国家药监局关于发布金鸡丸中毛两面针素检查项补充检验方法等5项补充检验方法的公告（2020年第12号）

　　按照《中华人民共和国药品管理法》及其实施条例的有关规定，《金鸡丸中毛两面针素检查项补充检验方法》《金鸡片中毛两面针素检查项补充检验方法》《金鸡颗粒中毛两面针素检查项补充检验方法》《风湿二十五味丸中松香酸检查项补充检验方法》和《参三七伤药胶囊（片）中松香酸与苏丹红IV检查项补充检验方法》5项药品补充检验方法经国家药品监督管理局批准，现予发布。
　　特此公告。
　　附件：1.金鸡丸中毛两面针素检查项补充检验方法（BJY 202001）
　　　　　2.金鸡片中毛两面针素检查项补充检验方法（BJY 202002）
　　　　　3.金鸡颗粒中毛两面针素检查项补充检验方法（BJY 202003）
　　　　　4.风湿二十五味丸中松香酸检查项补充检验方法（BJY 202004）
　　　　　5.参三七伤药胶囊（片）中松香酸与苏丹红IV检查项补充检验方法（BJY 202005）

　　国家药监局
　　2020年2月6日

附件1

金鸡丸中毛两面针素检查项补充检验方法

（BJY 202001）

【检查】毛两面针素

（1）取本品适量，研细，取约3g，置锥形瓶中，加乙醇40ml，超声处理40分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取毛两面针素对照品适量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取供试品溶液10μl、对照溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（20︰5︰3︰1︰0.18）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得显相同颜色的荧光斑点；若出现相同颜色的荧光斑点，或相同位置有干扰不能判断时，则采用下列高效液相色谱法验证。

（2）照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）测定

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－0.1%磷酸溶液（21∶79）为流动相；检测波长为330nm。理论塔板数按毛两面针素峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  取毛两面针素对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml中含30μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品适量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇20ml，密塞，称定重量，超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与上述供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

结果判断  供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二级管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。

备注：必要时，可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议使用乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液流动相系统。

起草单位：湖南省药品检验研究院（湖南药用辅料检验检测中心）

复核单位：山东省食品药品检验研究院

湖北省药品监督检验研究院

附件2

金鸡片中毛两面针素检查项补充检验方法

（BJY 202002）

【检查】毛两面针素

（1）取本品适量，除去包衣，研细，取约5g，置锥形瓶中，加乙醇40ml，超声处理40分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取毛两面针素对照品适量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取供试品溶液10μl、对照溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（20︰5︰3︰1︰0.18）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得显相同颜色的荧光斑点；若出现相同颜色的荧光斑点，或相同位置有干扰不能判断时，则采用下列高效液相色谱法验证。

（2）照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）测定

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－0.1%磷酸溶液（21∶79）为流动相；检测波长为330nm。理论塔板数按毛两面针素峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  取毛两面针素对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml中含30μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品适量，除去包衣，研细，取2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇20ml，密塞，称定重量，超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与上述供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

结果判断  供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二级管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。

备注：必要时，可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议使用乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液流动相系统。

起草单位：湖南省药品检验研究院（湖南药用辅料检验检测中心）

复核单位：山东省食品药品检验研究院

湖北省药品监督检验研究院

附件3

金鸡颗粒中毛两面针素检查项补充检验方法

（BJY 202003）

【检查】毛两面针素

（1）取本品适量，研细，取约8g，置具塞锥形瓶中，加乙醇40ml，密塞，超声处理40分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取毛两面针素对照品适量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版通则0502）试验，吸取供试品溶液10μl、对照溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（20︰5︰3︰1︰0.18）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得显相同颜色的荧光斑点；若出现相同颜色的荧光斑点，或相同位置有干扰不能判断时，则采用下列高效液相色谱法验证。

（2）照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）测定

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－0.1%磷酸溶液（21∶79）为流动相；检测波长为330nm。理论塔板数按毛两面针素峰计算，应不低于3000。

对照品溶液的制备  取毛两面针素对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml中含30μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品适量，研细，取4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇20ml，密塞，称定重量，超声处理40分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与上述供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

结果判断  供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，则采用二级管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。

备注：必要时，可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。建议使用乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液流动相系统。

起草单位：湖南省药品检验研究院（湖南药用辅料检验检测中心）

复核单位：山东省食品药品检验研究院

湖北省药品监督检验研究院

附件4

风湿二十五味丸中松香酸检查项

补充检验方法

（BJY 202004）

【检查】松香酸  照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%甲酸（75:25）为流动相；检测波长为241 nm。理论板数按松香酸峰计算应不低于3000。

对照溶液的制备（临用新制）  取松香酸对照试剂适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含2µg的溶液，作为对照试剂溶液。另取11-羰基-β-乙酰乳香酸对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含2µg的溶液，作为参照溶液。

供试品溶液的制备 取本品，研细，取0.2g，精密称定，精密加入乙醇20ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取供试品溶液、对照试剂溶液与参照溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果判断  供试品色谱中，在与松香酸对照试剂溶液色谱峰保留时间相应的位置上不得出现相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不同（松香酸对照试剂色谱峰在241nm显示最大吸收）；若吸收光谱相同，且该色谱峰的峰面积大于11-羰基-β-乙酰乳香酸参照溶液色谱峰的峰面积值，则视为阳性检出。

备注：必要时，可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。

起草单位：连云港市食品药品检验检测中心

复核单位：海南省药品检验所

          四川省食品药品检验检测院

附件5

参三七伤药胶囊（片）中松香酸与苏丹红IV检查项补充检验方法

（BJY 202005）

【检查】松香酸  照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%甲酸（75:25）为流动相；检测波长为241 nm。理论板数按松香酸峰计算应不低于3000。

对照溶液的制备（临用新制）  取松香酸对照试剂适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含2µg的溶液，作为对照试剂溶液。另取11-羰基-β-乙酰乳香酸对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含2µg的溶液，作为参照溶液。

供试品溶液的制备  取参三七伤药胶囊内容物；取参三七伤药片10片，除去包衣，研细，取0.2g，精密称定，精密加入乙醇20ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取供试品溶液、对照试剂溶液与参照溶液各10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果判断  供试品色谱中，在与松香酸对照试剂溶液色谱峰保留时间相应的位置上不得出现相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不同（松香酸对照试剂色谱峰在241nm显示最大吸收）；若吸收光谱相同，且该色谱峰的峰面积大于11-羰基-β-乙酰乳香酸参照溶液色谱峰的峰面积值，则视为阳性检出。

备注：必要时，可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。

【检查】苏丹红IV  照高效液相色谱法（中国药典2015年版通则0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.02mol/L乙酸铵溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为520nm。理论板数按苏丹红IV峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备  取苏丹红IV对照品适量，加乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备   取参三七伤药胶囊内容物；取参三七伤药片10片，除去包衣，研细，取粉末2g，加乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，取续滤液，即得。

测定法  分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果判断  供试品色谱中，在与苏丹红IV对照品溶液色谱峰保留时间相应的位置上不得出现相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在400nm—600nm波长范围内的紫外-可见吸收光谱，吸收光谱应不相同。

备注：必要时，可采用高效液相色谱-质谱联用方法验证。

起草单位：连云港市食品药品检验检测中心

复核单位：湖南省药品检验研究院（湖南药用辅料检验检测中心）

          重庆市食品药品检验检测院